안녕하세요,
APEX BI(G. stearothermophilus)_Disc Type 생균수 시험 관련 문의드립니다.

하기와 같이 시험을 수행하고 있는데, 계속 낮은 회수율(10 ~ 20 %)를 보이고 있습니다.

1. 채취한 4개 검체를 멸균 초순수 10 mL이 포함된 50 mL  Tube에 각각 넣고, Sonication
 - 조건  : 15 분,  30 분
2. 30 ~ 300 CFU가 되도록 멸균 초순수 10 mL이 포함된 15 mL Tube에서 희석
3. 95 - 100 °C에서 15 분간 Heat shock
- 항온 장비 : Water Bath, Heat Block
4. TSA에 도말

Sonication 시간을 높이면 조금 더 높은 회수율을 보이는 것 같아, Disc에 도말된 BI를 회수하는데 1차 적인 문제가 있을 것으로 생각하고 있습니다.
- 온도 장비의 문제여부 확인을 위해 Water Bath와 Heat Block 에서 각각 시험해 보았지만, 회수율에 큰 영향은 없었습니다.

시험 방법 중, 저희가 간과하고 있는 부분이나 추가로 보완해야할 부분(Sonocation 세기, 조건 등)에 대해 확인부탁드립니다.

추가로, Plate간 생장하는 균 수의 편차가 큰 편인데 시험 특성상 편차가 원래 크게 나타나는 부분인 건지 확인부탁드립니다.
- 동일 BI 희석액을 도말해도 경우에 따라 약 2배의 균 생장률 차이를 보이고 있습니다.